真菌毒素檢測(cè)儀是糧食、飼料、食品行業(yè)檢測(cè)黃曲霉毒素、嘔吐毒素等污染物的關(guān)鍵設(shè)備,其操作規(guī)范性直接影響檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確性。實(shí)際使用中,操作人員易因?qū)x器原理、流程細(xì)節(jié)把控不足陷入誤區(qū),以下梳理4類常見(jiàn)誤區(qū)及對(duì)應(yīng)避免方法。?
一、樣本處理誤區(qū):忽視前處理規(guī)范性?
常見(jiàn)問(wèn)題?
樣本研磨不充分:如谷物樣本僅簡(jiǎn)單破碎(粒徑>2mm),導(dǎo)致毒素未全釋放,檢測(cè)結(jié)果偏低;?
提取液配比錯(cuò)誤:未按說(shuō)明書(shū)要求配制提取液(如甲醇-水比例應(yīng)為7:3卻配成6:4),影響毒素溶解效率;?
過(guò)濾/離心不全:提取液中殘留雜質(zhì)(如淀粉、纖維),堵塞檢測(cè)卡或污染儀器進(jìn)樣系統(tǒng),導(dǎo)致假陽(yáng)性。?
避免方法?
樣本研磨需達(dá)到均勻粉末狀(粒徑≤0.5mm),可使用行星式球磨機(jī)(轉(zhuǎn)速300-500r/min,研磨5-10分鐘);?
用移液槍精準(zhǔn)量取試劑,配制后用pH試紙驗(yàn)證提取液pH值(如黃曲霉毒素檢測(cè)提取液pH需在7.0±0.2);?
提取后需經(jīng)定性濾紙過(guò)濾2次,或3000r/min離心10分鐘,取上清液作為待檢測(cè)液,確保無(wú)可見(jiàn)雜質(zhì)。?
二、儀器操作誤區(qū):參數(shù)設(shè)置與操作流程偏差?
常見(jiàn)問(wèn)題?
檢測(cè)溫度未達(dá)標(biāo):如免疫層析類檢測(cè)儀需在25℃±3℃環(huán)境下運(yùn)行,若室溫過(guò)低(<18℃)直接檢測(cè),會(huì)延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間,導(dǎo)致結(jié)果誤判;?
進(jìn)樣量不準(zhǔn)確:手動(dòng)進(jìn)樣時(shí)未控制進(jìn)樣體積(如要求100μL卻注入80μL),或進(jìn)樣速度過(guò)快產(chǎn)生氣泡,影響檢測(cè)信號(hào);?
未進(jìn)行儀器預(yù)熱:開(kāi)機(jī)后直接檢測(cè),儀器光學(xué)系統(tǒng)(如酶標(biāo)儀的光源)未穩(wěn)定,導(dǎo)致吸光度測(cè)量誤差超±5%。?
避免方法?
檢測(cè)前用溫濕度計(jì)確認(rèn)環(huán)境條件,若溫度不達(dá)標(biāo),開(kāi)啟恒溫箱或空調(diào)調(diào)節(jié),待溫度穩(wěn)定后再操作;?
使用帶刻度的移液器(精度±1μL)定量進(jìn)樣,進(jìn)樣時(shí)槍頭緊貼管壁緩慢注入,避免產(chǎn)生氣泡;?
開(kāi)機(jī)后按說(shuō)明書(shū)要求預(yù)熱儀器(通常15-30分鐘),待顯示屏顯示“就緒”且光源強(qiáng)度穩(wěn)定(如酶標(biāo)儀吸光度值波動(dòng)≤0.005)后開(kāi)始檢測(cè)。?
三、結(jié)果判讀誤區(qū):忽視干擾因素與標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照?
常見(jiàn)問(wèn)題?
未做空白對(duì)照:僅檢測(cè)樣本而未同步檢測(cè)空白試劑(如提取液),無(wú)法判斷儀器是否受污染;?
誤讀檢測(cè)卡結(jié)果:如將免疫層析卡的“質(zhì)控線模糊”判定為陰性,忽視可能因試劑過(guò)期導(dǎo)致的無(wú)效結(jié)果;?
忽略交叉反應(yīng):用黃曲霉毒素檢測(cè)卡檢測(cè)玉米赤霉烯酮,因抗體交叉反應(yīng)出現(xiàn)假陽(yáng)性,卻未進(jìn)一步驗(yàn)證。?
避免方法?
每次檢測(cè)需同步設(shè)置空白對(duì)照、陰性對(duì)照、陽(yáng)性對(duì)照,若對(duì)照結(jié)果異常(如陽(yáng)性對(duì)照未顯色),需重新檢測(cè);?
按說(shuō)明書(shū)判讀標(biāo)準(zhǔn)執(zhí)行:如免疫層析卡需在反應(yīng)10-15分鐘內(nèi)判讀,質(zhì)控線清晰且檢測(cè)線無(wú)顯色為陰性,反之需結(jié)合數(shù)值判斷;?
若檢測(cè)結(jié)果超出常規(guī)范圍(如糧食中嘔吐毒素含量>500μg/kg),需用另一品牌檢測(cè)卡或高效液相色譜儀(HPLC)復(fù)檢,排除交叉反應(yīng)干擾。?
四、維護(hù)保養(yǎng)誤區(qū):長(zhǎng)期使用未做清潔與校準(zhǔn)?
常見(jiàn)問(wèn)題?
檢測(cè)后未清潔進(jìn)樣系統(tǒng):如色譜類檢測(cè)儀進(jìn)樣針殘留毒素,下次檢測(cè)時(shí)污染樣本,導(dǎo)致結(jié)果偏差;?
未定期校準(zhǔn)儀器:如酶標(biāo)儀超過(guò)6個(gè)月未校準(zhǔn),吸光度準(zhǔn)確性下降,檢測(cè)數(shù)據(jù)可信度降低;?
試劑儲(chǔ)存不當(dāng):將檢測(cè)卡、抗體試劑常溫存放(需2-8℃冷藏),導(dǎo)致試劑失效。?
避免方法?
每次檢測(cè)后,用清洗液(如甲醇-水混合液)沖洗進(jìn)樣系統(tǒng)3-5次,酶標(biāo)儀需用蒸餾水清洗比色皿并晾干;?
每3-6個(gè)月用標(biāo)準(zhǔn)品(如10μg/L黃曲霉毒素標(biāo)準(zhǔn)液)校準(zhǔn)儀器,若檢測(cè)值與標(biāo)準(zhǔn)值偏差>±10%,需聯(lián)系廠家進(jìn)行專業(yè)校準(zhǔn);?
試劑需按儲(chǔ)存條件存放,開(kāi)封后的檢測(cè)卡需在1小時(shí)內(nèi)使用,未用完的試劑密封后放回冰箱,避免反復(fù)凍融(凍融次數(shù)≤3次)。?
此外,操作人員需定期參加真菌毒素檢測(cè)儀廠家培訓(xùn),熟悉不同類型毒素檢測(cè)的原理與注意事項(xiàng),同時(shí)建立《儀器操作記錄臺(tái)賬》,記錄每次檢測(cè)的樣本信息、儀器參數(shù)、結(jié)果數(shù)據(jù),便于追溯與問(wèn)題排查,從根本上減少操作誤區(qū),保障檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性與可靠性。?